Техника определения группы крови по стандартным сывороткам - ZdorovMnogoLet.ru
Рейтинг статьи
1 звезда2 звезды3 звезды4 звезды5 звезд (пока оценок нет)
Загрузка...

Техника определения группы крови по стандартным сывороткам

Техника определения группы крови при помощи стандартных сывороток

Определение группы крови производят в помещении с хорошим освещением при температуре +15 — +25 0 С.

На пластине для определения группы крови с левой стороны надписывают 0ab(анти-А+В), в середине — Аb (анти-В) и справа — Вa (анти-А), на верхнем крае – фамилию и инициалы лица, у которого определяют группу крови.

Под соответствующим обозначением группы крови на пластинку наносят по одной большой капле (0,1 мл) стандартных сывороток соответствующих групп 2-х серий. Всего получается 6 капель, которые образуют два ряда по три капли в следующем порядке слева направо: 0ab(анти-А+В), Аb (анти-В) и Вa (анти-А).

Рядом с каждой каплей сыворотки наносят маленькую каплю (0,01 мл) исследуемой крови, соблюдая соотношение 10:1.

Смешивают каплю сыворотки с каплей крови индивидуальной чистой стеклянной палочкой.

После размешивания капель пластинку покачивают, затем на 1-2 минуты оставляют в покое и снова периодически покачивают.

Наблюдение за ходом реакции проводится в течение 5 минут. Агглютинация начинается в течение первых 10-30 секунд, однако наблюдение следует вести до 5 минут ввиду возможности более поздней агглютинации с эритроцитами, содержащими слабые разновидности антигенов А или В.

Через 3 минуты в капли смеси сыворотки с эритроцитами, в которых наступила агглютинация, добавляют по одной капле (0,05 мл) изотонического раствора хлорида натрия и продолжают наблюдение при периодическом покачивании пластинки до истечения 5-ти минут.

Оценка результата: реакция в каждой капле может быть положительной (наличие агглютинации эритроцитов) или отрицательной (отсутствие агглютинации).

Различные сочетания положительных и отрицательных результатов дают возможность судить о групповой принадлежности исследуемой крови (см. табл.1).

Результат реакции с изогемагглютинирующими сывороткамиИсследуемая кровь принадлежит к группе
0ab(I) анти-(А+В)Аb(II) (анти-В)Ba(III) (анти-А)АВО(IV) контроль
— —— —— —0(I)
+ +— —+ +A(II)
+ ++ +— —B(III)
+ ++ ++ +AB(IV)

Знаком плюс (+) обозначено наличие агглютинации, знаком минус (-) — ее отсутствие.

Как видно из таблицы, результат оценивается в зависимости от реакции исследуемых эритроцитов со стандартными сыворотками группы Оab (анти-А+В), Ab (анти-В), Ba (анти-А). В тех случаях, когда положительный результат получен с сывороткой всех трех групп, для исключения неспецифической агглютинации производится контрольное исследование со стандартной сывороткой группы ABО(IV), не содержащей групповых агглютининов. Лишь отсутствие агглютинации в этой контрольной пробе позволяет учесть положительный результат с сыворотками групп Оab (анти-А+В), Ab (анти-В), Ba (анти-А) как истинный, т.е. принадлежность исследуемой крови к группе AB(IV). При наличии панагглютинации, т.е. агглютинации со всеми сыворотками и, соответственно, невозможности определить групповую принадлежность по системе АВО, кровь больного подлежит обязательному направлению на СПК или в ОПК для исследования специалистом-изосерологом.

3. Определение группы крови системы АВО моноклональными реагентами анти-А, анти-В, анти-АВ.

Реагенты анти-А, анти-В, анти-АВ предназначены для определения групп крови человека системы АВО в прямых реакциях гемагглютинации и применяются взамен или параллельно с поликлональными иммунными гемагглютинирующими сыворотками.

Порядок проведения исследования:

На планшет или пластину индивидуальными пипетками нанести реагенты анти-А, анти-В, анти-АВ по одной большой капле (0,1 мл) под соответствующими надписями.

Рядом с каплями реагентов нанести по одной маленькой капле исследуемой крови (0,01- 0,03 мл).

Смешать кровь с реагентом (в лунке планшета – тщательно вымытым сухим шариком, покачивая планшет; на пластине – чистой индивидуальной сухой палочкой).

Наблюдение за ходом реакции с реагентами следует вести при легком покачивании пластины или планшета в течение 5 минут. Агглютинация эритроцитов обычно наступает в первые 3-5 сек., однако наблюдение следует продолжить ввиду более позднего появления агглютинации с эритроцитами, содержащими слабые разновидности антигенов А или В.

Результат реакции в каждой капле может быть положительным или отрицательным. Положительный результат выражается в агглютинации (склеивании) эритроцитов. Агглютинаты видны невооруженным глазом в виде мелких красных агрегатов, быстро склеивающихся в крупные хлопья. При отрицательной реакции капля остается равномерно окрашенной в красный цвет, агглютинаты в ней не обнаруживаются.

Учет результатов реакции агглютинации при определении групп крови моноклональными реагентами представлен в таблице 2:

Учет реакции агглютинацииГруппа крови АВО
анти-Аанти-Ванти А+В
0(I)
++A(II)
++
+++AB(IV)

(+) – наличие агглютинации; (-) – отсутствие агглютинации

При положительном результате реакции агглютинации со всеми реагентами необходимо исключить спонтанную неспецифическую агглютинацию исследуемых эритроцитов, для чего следует смешать на плоскости 1 каплю изотонического раствора хлорида натрия с 1 каплей исследуемых эритроцитов. Кровь можно отнести к группе АВ(IV) только при отсутствии агглютинации эритроцитов в изотоническом растворе хлорида натрия.

Определение группы крови и резус-фактора

Определение группы крови и резус-фактора делятся на два способа:

  1. первичное определение группы крови и резус фактора (цоликлоны Анти-А, Анти-B и Анти-D)
  2. вторичная диагностика группы крови и резус-фактора (стандартные сыворотки и перекрестный способ, определение фенотипа, т.е. антигенов C, c, E, e, C w , K, k)

Экспресс-диагностика (первичное определение группы крови и Rh-фактора) не учитывает антигены Келл, не говоря уже про другие системы верификации. Поэтому цоликлоны применяют только для первичного определения группы крови и резус-фактора и при экстренных показаниях трансфузии компонентов крови.

Подробнее о самой редкой группе крови в Мире можно найти здесь.

Определение группы крови и резус-фактора цоликлонами анти-А, анти-В и Анти-D по системе AB0 и системе Резус

Определение группы крови и резус-фактора цоликлонами анти-А , анти-В и Анти-D супер является наиболее современным и относительно простым методом. Для определения группы крови используются цоликлоны, т.е. моноклональные антитела.

Что требуется для определения группы крови и резус-фактора?

цоликлон анти-А ;

цоликлон анти-В ;

цоликлон анти-D ;

– раствор натрия хлорида 0,9 %; специальный планшет; стерильные палочки.

Алгоритм и порядок определения группы крови

Нанести цоликлоны анти-А , анти-В на специальный планшет по одной большой капле (0,1 мл), под соответствующими надписями.

Рядом с ними капнуть исследуемую кровь (0,01–0,03 мл) по одной маленькой капле. Перемешать их и наблюдать за наступлением или отсутствием реакции агглютинации в течение 3 мин. При сомнительном результате добавить 1 каплю 0,9% физиологического раствора.

Расшифровка результатов определения группы крови

  • если реакция агглютинации наступила с анти-А цоликлоном , то исследуемая кровь относится к группе А (II);
  • если реакция агглютинации наступила с анти-B цоликлоном , то исследуемая кровь относится к группе B (III);
  • если реакция агглютинации не наступила с анти-А и с анти-B цоликлонами, то исследуемая кровь относится к группе 0 (I);
  • если реакция агглютинации наступила с анти-А и с анти-B цоликлонами, то исследуемая кровь относится к группе AB (IV), как показано на рисунке.
Читайте также:  Можно ли есть яблоки при сахарном диабете?

Определение резус-фактора цоликлоном Анти- D

На планшете смешивают большую каплю (0,1 мл) анти-D цоликлона и маленькую каплю (0,01 мл) исследуемой крови пациента. За наступлением реакции агглютинации или её отсутствием наблюдают в течение 3 мин.

  • если реакция агглютинации наступила с цоликлоном анти-D , то исследуемая кровь относится к резус-положительной (Rh + )
  • если реакция агглютинации не наступила с цоликлоном анти-D , то исследуемая кровь относится к резус-отрицательной (Rh — )

Другими словами, при смешивании цоликлона Анти-D с резус-положительными эритроцитами наступает реакция агглютинации, а если кровь резус-отрицательная — агглютинация отсутствует (как показано на рисунке — четвертая группа крови резус-отрицательная).

Определение групп крови стандартными сыворотками

Определение групп крови стандартными изогемагглютинирующими сыворотками — поиск и обнаружение в крови антигенов А и В с помощью реакции агглютинации. Для достижения цели используют:

  • Стандартные изогемагглютинирующие сыворотки групп крови О (I) — бесцветная, А (II) — синяя, В (III) — красная, АВ (IV) — жёлтая.
  • Белые тарелки, маркированные группами крови: 0 (I), А (II), В (III), AB (IV).
  • NaCl 0,9%
  • Стеклянные палочки

Методика определение группы крови стандартными сыворотками

Методика определение группы крови стандартными сыворотками

  1. Подписать тарелку (Ф.И.О. пациента);
  2. Нанести обозначения двух серий стандартных сывороток I, II и III групп крови в объёме 0,1 мл, образующие два ряда по три капли слева направо: 0 (I), А (II), В (III);
  3. Забрать кровь из вены. Шесть капель исследуемой крови пациента перенести стеклянной палочкой на пластину в шесть точек рядом с каплей стандартной сыворотки и перемешать.

Агглютинация начнется через 30 сек. В те капли, где произошла агглютинация, добавить по одной капле NaCl 0,9% и оценить результат.

Оценка результатов определение группы крови стандартными сыворотками

Положительная реакция агглютинации может быть пескообразной или лепестковой. При отрицательной реакции капля остаётся равномерно окрашенной в красный цвет. Результаты реакций в каплях с сыворотками одной и той же группы (двух серий) должны совпадать. Принадлежность исследуемой крови к соответствующей группе определяют по наличию или отсутствию агглютинации при реакции с соответствующими сыворотками после наблюдения в течение 5 мин. При этом следует отметить, что если сыворотки всех трёх групп дали положительную реакцию, это указывает на то, что испытуемая кровь содержит оба агглютиногена (А и В) и принадлежит к группе AB (IV). Однако в таких случаях для исключения неспецифической реакции агглютинации необходимо провести дополнительное контрольное исследование испытуемой крови со стандартной изогемагглютинирующей сывороткой группы AB (IV), не содержащей агглютининов. Лишь отсутствие агглютинации в этой капле при наличии агглютинации в каплях, содержащих стандартные сыворотки групп 0 (I), А (II) и В (III), позволяет считать реакцию специфической и отнести исследуемую кровь к группе АВ (IV).

Определение группы крови перекрёстным способом

Определение группы крови перекрестным способом — обнаружение наличия или отсутствия в исследуемой крови антигенов А и В с помощью стандартных изогемагглютинирующих сывороток, а также антител α и β с помощью стандартных эритроцитов. Реакцию со стандартными сыворотками проводят описанным выше способом.

Методика определения группы крови перекрестным способом

Реакция со стандартными эритроцитами

Для реакции со стандартными эритроцитами необходимы стандартные эритроциты трёх групп крови: 0 (I), А (II), B (III).

Методика проведения реакции со стандартными эритроцитами

  1. Кровь для исследования берут из вены в пробирку, центрифугируют или оставляют на 30 мин для получения сыворотки.
  2. На маркированную тарелку наносят три больших капли (0,1 мл) сыворотки крови из пробирки, а рядом с ними по одной маленькой капле (0,01 мл) стандартных эритроцитов групп.
  3. Соответствующие капли смешивают стеклянными палочками, планшет покачивают, наблюдают в течение 5 мин, в капли с агглютинацией добавляют NaCl 0,9% и оценивают результат.

Оценка результатов проведения реакции со стандартными эритроцитами

Оценивают результаты, полученные со стандартными изогемагглютинирующими сыворотками и стандартными эритроцитами. Особенность результатов реакции со стандартными эритроцитами — эритроциты группы 0 (I) считают контрольными. Результат перекрёстного способа считают достоверным, если при реакции со стандартными изогемагглютинирующими сыворотками и со стандартными эритроцитами ответы о группе исследуемой крови совпадают. Если этого не происходит, обе реакции следует переделать.

Техника определения группы крови по стандартным сывороткам

Содержание

Как происходит определение группы крови по стандартным сывороткам? Наверное, наблюдая за действиями лаборанта и за происходящей на специальной планшетке химической реакцией, подобный вопрос задавали себе многие. Ничего загадочного в этом процессе нет, а механизм установления групповой принадлежности основан на реакции агглютинации, которая происходит при взаимодействии компонентов крови агглютиногенов и элементов сыворотки.

Основные характеристики групп

Определение группы по стандартным сывороткам основано на том, что в крови человека содержатся, в различных комбинациях агглютиногены (А и В) и агглютинины (a и b). При встрече одноименных агглютинина и агглютиногена происходит быстрая агглютинация, а на планшетке этот процесс будет выглядеть как распадание однородного кровяного пятна на множество мелких пятнышек.

Для определения группы крови используются сыворотки, содержащие агглютинины различных групп, которые вступают в реакцию с содержащимися на поверхности эритроцитов агглютиногенами:

  • 0 (I) — содержит только агглютинины a и b;
  • A (II) — имеется антиген А и агглютинин b;
  • В (III) — есть агглютиноген B и антитело а;
  • АВ (IV) — в сыворотке нет антител, а на поверхности эритроцита располагается агглютеногенный комплекс АВ.

В экстренных случаях (подготовка к срочной операции или необходимость немедленного восполнения кровопотери) проводят смешивание, капая кровь из прокола на пальце больного прямо на планшетку с налитыми на нее стандартными сыворотками.

Техника проведения анализа

Для исследования применяется плоская планшетка с углублениями в ней. Углубления расположены по 3 в ряд (имеется 2 ряда) и имеется одно внизу.

Над каждой парой углублений для удобства лаборанта написано I, II или III и для нанесения в ячейки соответствующих стандартных сывороток.

Читайте также:  Можно ли пить кофе при сахарном диабете?

Анализ проводится так:

  1. В первом ряду в соответствующие ячейки наливается несколько капель сывороточного раствора I, II и III вида (в соответствии с наименованием углубления).
  2. Во второй ряд дублируются аналогичные растворы, но другой серии изготовления (необходимый контроль для избегания ложной агглютинации из-за некачественной сыворотки).
  3. В растворы стеклянной палочкой добавляются по капле венозной или периферической крови.
  4. Перемешивание, чтобы избежать случайного повреждения эритроцитов, производится плавным покачиванием планшетки.
  5. Далее материал оставляется на 5 минут, после чего проводится оценка полученного результата.

Если, к примеру, в одном углублении с цифрой II произошла агглютинация, а в другом с аналогичным реактивом нет, то определение группы крови с помощью сывороточных составов считается неверным. Его необходимо повторить, используя сыворотки 2 других серий.

Оценка результатов

Тип крови стандартными сывороточными реактивами определяется на основании видимой реакции агглютинации, и результат может быть следующим:

  1. I — основные и контрольные капли на лабораторной тарелочке остались без изменений.
  2. II — химическая реакция произошла в ячейках I и III.
  3. III — наблюдается агглютинация в углублении I и II.
  4. IV — имеются изменения во всех емкостях лабораторной тарелочки.

При определении IV типа всегда проводится контроль с сывороткой IV, чтобы предотвратить ложноположительный результат. В контрольном смешивании по истечении 5 минут не должно произойти никаких изменений.

Полученные данные учитываются только в том случае, когда агглютинация ярко выражена. Слабая химическая реакция может быть из-за старых реактивов или из-за неправильного проведения анализа. Результат не может считаться достоверным. В сомнительных случаях, помимо исследования стандартными сывороточными составами, могут быть сделаны для уточнения группы тесты с цоликлонами или «эритротест».

С помощью стандартных сывороточных составов определение группы возможно за несколько минут. Метод очень прост и не требует от лаборанта специальных навыков.

V.III Группа крови, гемотрансфузии

5.8. Стандарт «Техника определения группы крови стандартными сыворотками»

Цель:определить групповую принадлежность крови.

Показания: необходимость переливания крови: во время операции; предоперационном периоде; заболевании крови.

Ресурсы:планшет с маркированными ячейками; флакон с изотоническим раствором; пипетки; стеклянные палочки; скарификатор одноразовый; стерильные шарики; спирт 70%; стандартные гемагглютинирующие сыворотки 2-х серий; песочные часы; перчатки; емкость КБУ.

Алгоритм действия:

  1. Проверьте качество стандартных гемагглютинирующих сывороток:

по внешнему виду (светлая прозрачная), сохранность ампулы, этикетку с указанием группы крови, титра , срок годности.

  1. Объясните пациенту цель и ход процедуры.
  2. Усадите или уложите больного так, чтобы можно было наблюдать за общим состоянием.
  3. Проведите деконтоминацию рук на гигиеническом уровне.
  4. Наденьте стерильные перчатки.
  5. Нанесите отдельными пипетками стандартные сыворотки по 1-й капле в ячейки специальной планшета по 2 серии ( I, II, III группы).
  6. Обработайте ватным тампоном со спиртом концевую фалангу безымянного пальца левой руки пациента,
  7. Произведите укол скарификатором, первую каплю снимите стерильным ватным тампоном.
  8. Возьмите стеклянной палочкой каплю крови, используя для этого разные стеклянные палочки.
  9. Поместите в каждую ячейку планшета рядом с сывороткой крови в пропорции 1:10
  10. Смешайте кровь с каплей сыворотки, осторожно покачивайте в руках.
  11. Наблюдайте за реакцией в течение 5 минут.
  12. Добавьте физиологический раствор по 1 капле к каплям сыворотки с эритроцитами, где наступила агглютинация.
  13. Оцените результат : если кровь свернулась(агглютинация) то реакция положительная, если кровь не свернулась то реакция отрицательная.
  14. Проведите контрольное исследование со стандартной сывороткой группы АВ(IV) группы, если во всех 6 ячейках тарелки произошла реакция агглютинация.

16.Снимите перчатки и поместите в КБУ.

0 (I)A (II)B (III)AB (IV)Группа крови
+O(I)
+++A(II)
+++B(III)
+++AB(IV)

где «+» — реакция агглютинация; «-»- нет реакции агглютинации.

5.9. Стандарт «Техника определения группы крови с применением цоликлонов»

Цель:определить групповую принадлежность крови.

Показания:необходимость переливания крови: во время операции, предоперационном периоде.

Ресурсы:ампулы с цоликлонами анти- А и анти- В, анти-АВ, исследуемую кровь, стеклянные палочки, пипетки, планшет, скарификатор, спирт, стерильные ватные шарики, стерильные перчатки, часы; емкость КБУ.

Алгоритм действия:

1. Проверьте качество цоликлона анти-А ,анти Б, анти АВ по внешнему виду: (светлая прозрачная), сохранность ампулы, этикетку с указанием группы крови, титра , срок годности.

2. Объясните пациенту цель и ход процедуры.

3. Усадите или уложите больного так, чтобы можно было наблюдать за общим состоянием.

4. Проведите деконтоминацию рук на гигиеническом уровне.

5. Наденьте стерильные перчатки.

6. Нанесите на планшет индивидуальными пипетками цоликлоны анти-А, анти-В и анти-АВ по одной большой капле (0,1 мл).

7. Произведите укол скарификатором, первую каплю снимите стерильным ватным тампоном.

8. Возьмите стеклянной палочкой каплю крови, используя для этого разные стеклянные палочки.

9. Нанесите по одной маленькой капле исследуемой крови рядом с каплями цоликлонов и смешайте кровь отдельными стеклянными палочками.

10. Наблюдайте за ходом реакции визуально, легко покачивая планшет в течение 3 минут.

11. Снимите перчатки и поместите в КБУ.

Результат реакции с цоликлономИсследуемая кровь принадлежит к группе
Анти-ААнти-ВАнти-АВ
0(I)
++А(II)
++В(III)
+++АВ(IV)

Примечание: температура воздуха должна быть в пределах 15- 25 о С для профилактики ложной агглютинации.

5.10. Стандарт «Техника определения резус – фактора экспресс – методом»

Цель:определение резус- фактора.

Показания:необходимость переливания крови: во время операции, предоперационном периоде.

Ресурсы:пипетки, пробирки, физиологический раствор, универсальный антирезус-реагент, скарификатор, стерильные марлевые шарики, спирт, стерильный пинцет, стерильные перчатки, песочные часы; емкость КБУ.

Алгоритм действия:

1. Проверьте качество универсального резус реагента по внешнему виду: (светлая прозрачная), сохранность ампулы, этикетку с указанием группы крови, титра, срок годности.

2. Объясните пациенту цель и ход процедуры.

3. Усадите или уложите больного так, чтобы можно было наблюдать за общим состоянием.

4. Проведите деконтоминацию рук на гигиеническом уровне.

5. Наденьте стерильные перчатки.

6. Внесите пипеткой 2 капли сыворотки в конусную пробирку.

7. Произведите укол скарификатором, первую каплю снимите стерильным ватным тампоном.

8. Добавьте пипеткой 1 каплю крови.

9. Встряхните пробирку или вращайте между ладонями в течение 5 минут.

10. Посмотрите на стенки пробирки и оцените результат.

11. Если есть агглютинация, то у пациента резус-положительный фактор.

Читайте также:  5 диагностических мер при подозрении на вирховские вторичные образования

12. Если агглютинация не произошла, то кровь резус- отрицательная.

13. Добавьте в пробирку 2 капли физиологического раствора для исключения псевдоагглютинации.

14. Снимите перчатки и поместите в КБУ.

Примечание: Температура воздуха должна быть в пределах 15- 25 о С для профилактики ложной агглютинации.

Стандарт «Техника постановки пробы на индивидуальную совместимость по АВ0»

Цель:определить совместимость крови донора с кровью реципиента.

Показания:Необходимость переливания крови: во время операции, предоперационном периоде.

Ресурсы:донорская кровь, сыворотка крови реципиента, стеклянные палочки, пипетки, чашка Петри, шприц, игла, стерильные марлевые шарики, спирт, стерильный пинцет, стерильные перчатки, песочные часы; емкость КБУ.

Алгоритм действия:

  1. Объясните пациенту цель и ход процедуры.
  2. Усадите или уложите больного так, чтобы можно было наблюдать за общим состоянием.
  3. Проведите деконтоминацию рук на гигиеническом уровне.
  4. Наденьте стерильные перчатки.
  5. Возьмите у пациента кровь до 5 мл в пробирку из вены.
  6. Отцентрифугируйте пробирку с кровью для получения сыворотки.
  7. Нанесите пипеткой на чашку Петри 1 каплю сыворотки пациента и каплю крови донора.
  8. Смешайте стеклянной палочкой сыворотку и кровь.
  9. Наблюдайте за реакцией в течение 5 минут.
  10. Если есть реакция агглютинация, то кровь переливать нельзя.
  11. Добавьте 1 каплю физиологического раствора, чтобы исключить псевдоагглютинацию.
  12. Если нет агглютинации, то проба отрицательная и кровь совместима и ее можно переливать.
  13. Снимите перчатки и погрузите в емкость КБУ.

Стандарт «Техника постановки пробы на индивидуальную совместимость по резус — принадлежности»

Цель:определить совместимость крови донора с кровью реципиента.

Показания:Необходимость переливания крови: во время операции, предоперационном периоде.

Ресурсы:донорская кровь, сыворотка крови реципиента, стеклянные палочки, водяная баня, пипетки, чашка Петри, шприц, игла, стерильные марлевые шарики, спирт, стерильный пинцет, стерильные перчатки, песочные часы, водяная баня; емкость КБУ.

Алгоритм действия:

  1. Объясните пациенту цель и ход процедуры.
  2. Усадите или уложите больного так, чтобы можно было наблюдать за общим состоянием.
  3. Проведите деконтоминацию рук на гигиеническом уровне.
  4. Наденьте стерильные перчатки.
  5. Возьмите у пациента кровь до 5 мл в пробирку из вены.
  6. Отцентрифугируйте пробирку с кровью для получения сыворотки.
  7. Нанесите пипеткой на чашку Петри 1 каплю сыворотки пациента и каплю крови донора.
  8. Смешайте стеклянной палочкой сыворотку и кровь.
  9. Поставьте чашку Петри на водяную баню ( температура -42-45 градусов) на 5 мин.
  10. Если появиться реакция агглютинация то кровь несовместимая
  11. Добавьте 1 каплю физиологического раствора для исключения псевдоагглютинации.
  12. Если агглютинация отсутствует, то проба отрицательная и переливать кровь можно.
  13. Снимите перчатки и погрузите в емкость КБУ.

5.13. Стандарт «Техника определения резус – фактора с цоликлоном

Анти –Д»

Цель: определение резус- фактора.

Показания:Необходимость переливания крови: во время операции, предоперационном периоде.

Ресурсы:цоликлон анти-Д, планшет, стеклянные палочки, стерильные перчатки, часы, исследуемая кровь; емкость КБУ.

Алгоритм действия:

Последнее изменение этой страницы: 2016-04-19; Нарушение авторского права страницы

Как определить группу крови по стандартным сывороткам

Определение группы крови по стандартным сывороткам используется часто (по сравнению с другими методиками). В основе данной техники — содержащиеся в крови агглютинины и агглютиногены в различных комбинациях.

Соединение одноименных агглютиногена и агглютинина сопровождается реакцией агглютинации (однородное пятно распадается на многочисленные мелкие пятна, состоящие из эритроцитов, склеившихся между собой).

Суть метода

При оказании медицинской помощи не всегда удается быстро остановить кровотечение, для переливания требуется определение группы крови, резус-фактора.

Существуют 2 эритроцитных антигена (агглютиногены А и В) и 2 антитела (а и b). Различные комбинации антигенов и антител образуют 4 группы крови.

Данный способ имеет преимущества, т. к. позволяет свести к одному многочисленные измерения.

Методика определения показателей

Определение групп крови по стандартным сывороткам проводится с использованием реактивов, содержащих агглютинины разных групп, вступающих в реакцию с агглютиногенами, находящимися на поверхности эритроцитов.

Чтобы выявить группу крови, достаточно воспользоваться стандартными сыворотками лишь II и III групп. Однако для исключения возможных ошибок с целью дополнительного контроля используют и остальные (I и IV групп).

Изготовление сыворотки

Стандартные сыворотки для определения группы крови получают из донорской крови. С этой целью используют специальную систему: выделяют плазму вместе с находящимися в ней антителами, затем ее разводят изотоническим раствором хлорида натрия.

Помещают 1 мл раствора NaCl 0,9% в пробирку, добавляют плазму (1 мл), взбалтывают состав. Берут 1 мл полученной смеси, переносят в другую пробирку с изотоническим раствором.

Манипуляцию повторяют, пока не получат разведение смеси в пропорции 1:256. Другие разведения не используют, чтобы исключить возникновение ошибки.

Для одного исследования группы крови с помощью стандартных сывороток их требуется 3 (2 серий для каждой группы), отличающихся по цвету:

  • I (0) — прозрачная жидкость, флакон снабжен белой этикеткой;
  • II (А) — жидкость голубая, флакон с 2 полосами синего цвета;
  • III (В) — бледно-розовая жидкость, флакон с 3 розовыми полосками;
  • IV(АВ) — желтая жидкость, на этикетке флакона 4 желтые полоски.

На этикетках указаны:

  • титр;
  • срок годности;
  • дата выпуска;
  • серийный номер.
  • данные об изготовителе.

Проведение исследования

Температура в помещении должна быть в пределах +15…+ 25°С, требуется хорошее освещение.

Используют специальный планшет, имеющий области с пометками. На него наносят каждую сыворотку (берут 2 образца, 1 из них — контрольный, 2 — для диагностики).

Затем рядом с каждой каплей сыворотки размещают каплю крови, смешивая с каждым в отдельности реагирующим раствором. Спустя несколько минут (5-6) анализируют полученные данные:

  • если происходит реакция агглютинации — сывороточный тест считается положительным;
  • при отсутствии агглютинации тест отрицательный.

Результаты исследования

В случае положительного результата эритроциты склеиваются (в реагирующем растворе образуются красные сгустки).

Если цвет раствора не изменился, реакция считается отрицательной. Есть закономерности, зависящие от комбинаций отрицательных и положительных реакций, происходящих в растворах:

  • I(0), если ни в одном образце нет положительной реакции;
  • II (А), если в образце II (А) состояние не изменилось, а в 2 остальных оказалась положительная реакция;
  • III(В), если только в образце III(В) реакция оказалась отрицательной;
  • IV(АВ), если в каждом из 3 образцов реакция оказалась положительной.

Появление других комбинаций связано с погрешностями, возникающими при исследовании.

Использование старых реактивов или неправильное проведение анализа может сопровождаться слабой реакцией. В таких случаях с целью уточнения необходимо сделать тесты с использованием других методик.

Ссылка на основную публикацию